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荧光比分析,荧光比率法

admin 体育比分 2024-05-28 14浏览 0

如何比较两个化合物的荧光效率大小

据其大小来判断荧光效率。荧光量子效率是发射荧光的量子数与吸收激发光的量子数之比,可以应用荧光分光光度计测定其量子产率,根据其大小来判断荧光效率。

通常以参考物质(如琼脂糖溶液或钇铝石榴石晶体)的荧光量子产率为标准,将其设定为1,然后与待测物质的荧光量子产率进行比较。相对荧光量子产率可以用来评估不同物质的荧光效率,介于0和1之间。

一般说来,一个化合物的荧光强弱与它的刚性平面结构、取代基电子效应和共轭体系大小有关,不能简单地用共轭体系的大小来判断荧光的强弱。不同物质的荧光强度可以从是否具有p-p共轭双键的分子、p电子共轭程度等方面进行比较。

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测定化合物的荧光量子产率可以使用以下两种方法:比较法:将待测荧光样品与已知荧光量子产率的参考样品进行比较,通过测量它们的荧光强度来计算待测样品的荧光量子产率。这种方法简单易行,但需要准备标准样品,并且对测量条件要求较高,如激发光强度、检测器灵敏度等。

φf =发射荧光的分子数/被激发的分子总数。φf 值的大小是与物质的化学结构紧密相关的,任何影响以至于改变物质化学结构的因素都会导致荧光量子效率的改变,恒温下,可以说功,是分子结构的“函数”。

紫外分光光度法和荧光分析法的区别和各自的优缺点?

指代不同 可见分光光度法:通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的方法。荧光光度法:根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定的方法。

荧光分析的灵敏度比分光光度法的灵敏度高2~3个数量级,这是由于荧光分析的荧光和入射光之间成直角,而不在一条直线上,所以是在黑背景下检测荧光。而分光光度法的接收器与入射光在一条直线上,所以它是在亮背景下检测。因此荧光分析法比分光光谱法灵敏度高。

辐射与物质的非吸收作用引起的误差;荧光与光化学反应的影响,一般说来,荧光对分光光度测量产生的误差可以忽略,多数情况下显色体系的荧光效率很小,而且荧光发射是各向同性,只有一小部分沿着透射光方向进入检测器,使测量吸光度偏低,产生负偏离。

原理 相同点:吸光光度法和荧光分析法都是分子光谱。

为什么分子荧光分析法的灵敏度比分子吸光法的要高?

【答案】:因为荧光是从入射光的直角方向检测,即在黑背景下直接检测荧光的发射,而且荧光的发射强度大,可以通过各种方法来增强,从而提高检测的灵敏度,而分子吸光光度法是测定光线通过试样所散失的能量,存在着严重的背景干扰,因此分子荧光光度法灵敏度通常比分子吸光光度法的高。

因为与分子吸光光度法比较,萤光是从入射光的直角方向检测,即在黑暗背景下检测荧光的发射。分子吸光光度法中有入射光的背景干扰,因而分子荧光分析法的灵敏度通常比分子吸光光度法的要高2——4个数量级。

在吸收光谱中,检测器无法测定光的绝对强度,只能比较两束光的相对强弱(所以测吸收总是需要一个空白样作为参比)。而且溶液通常只能吸收入射光中极小的一部分,所以光线强度减弱是很微小的,就好像原来是10000个单位强度,吸收后变成了9999单位,仪器难以分辨这种微小变化。所以吸收光谱灵敏度不高。

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